可用于连接单链 RNA 和 DNA，用 5´-[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记，RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接，合成单链寡脱氧核苷酸。pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。10,000 units/ml，随酶提供10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液，10 mM ATP，50% PEG 8000

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到 RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。连接反应的背景被降为最低是因为：不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶已用于二代测序 Small RNA 的文库构建中，优化了接头的连接过程。

T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 DNA 或 RNA 的预腺苷化 5´ 末端连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。T4 Rnl2 截短型的表达来自 E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同，T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA 的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1- 249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。

5´AppDNA/RNA热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是RNA连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该酶连接时不需要 ATP，但需要5´预腺苷化的接头才能将其连接到RNA或单链DNA的3´OH末端。该酶也可催化3´端被2´-O-甲基化的RNA和5´预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为60-65℃。连接酶的点突变体不能使RNA或单链DNA的5´端磷酸腺苷化，因此降低非特异性的串联和环化。

T4 RNA 连接酶 2，也被称为 T4 Rnl2（gp24.1），同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4RNA 连接酶 1（NEB #M0204）不同的是，T4 RNA 连接酶 2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶连接时需要相邻的 3´ 羟基与 5´ 磷酸基。同时该酶也可用于连接双链结构中

可用于连接单链 RNA 和 DNA，用 5´-[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记，RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接，合成单链寡脱氧核苷酸。pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。10,000 units/ml，随酶提供10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液，10 mM ATP，50% PEG 8000

T4 RNA Ligase 1 (ssRNA Ligase) - (30,000 units/ml), 5000 units T4RNA连接酶1，是一种比M0204S/L浓度高3倍的连接酶，包装中还附有一瓶100mM的ATP，非常适用于反应体积受限的连接反应。反应体系中加入体积比为10%的DMSO可以增加pCp的连接。5000units。

T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 DNA 或 RNA 的预腺苷化 5´ 末端连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。T4 Rnl2 截短型的表达来自 E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同，T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA 的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1- 249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到 RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。连接反应的背景被降为最低是因为：不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶已用于二代测序 Small RNA 的文库构建中，优化了接头的连接过程。

5´AppDNA/RNA热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是RNA连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该酶连接时不需要 ATP，但需要5´预腺苷化的接头才能将其连接到RNA或单链DNA的3´OH末端。该酶也可催化3´端被2´-O-甲基化的RNA和5´预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为60-65℃。连接酶的点突变体不能使RNA或单链DNA的5´端磷酸腺苷化，因此降低非特异性的串联和环化。

T4 RNA 连接酶 2，也被称为 T4 Rnl2（gp24.1），同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4RNA 连接酶 1（NEB #M0204）不同的是，T4 RNA 连接酶 2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶连接时需要相邻的 3´ 羟基与 5´ 磷酸基。同时该酶也可用于连接双链结构中